Immunohistochemical Markers in the Differential Diagnosis of Melanoma and Nevus in Humans

SUMMARY: Immunohistochemistry allows in situ detection of cell and extracellular components through specific antibodies. The objective was to compare the immunohistochemical expression patterns of the S-100, HMB-45 and MART-1 proteins for differential diagnosis of malignant melanoma and melanocytic nevus in human skin biopsies. Thirty-nine biopsies of human tissue were used. They were divided into two groups: 19 in malignant melanoma and 20 in melanocytic nevi. Next, the samples were fixed with paraformaldehyde and processed following the protocol for inclusion. Then, immunohistochemical staining was performed. Finally, the histological and qualitative analysis of the samples was carried out. S-100, HMB-45, and MART-1 markers showed positive immunoreaction in melanoma biopsies. HMB-45 marker was generally present with weaker expression than S-100 and MART-1 in melanocytic nevus biopsies. No expression pattern was observed which specifically associates one or more markers with some types of histopathological diagnosis. Immunohistochemistry is fundamental in differential diagnosis of melanomas and melanocytic nevi. However, there is no antibody or set of antibodies which allows unequivocal diagnosis between melanoma and nevus. It is therefore necessary to analyze with care the expression pattern and location of the lesion using standard morphological characteristics.

RESUMEN: La inmunohistoquímica permite la detección in situ de componentes celulares y extracelulares a través de anticuerpos específicos. El objetivo de nuestro estudio fue comparar los patrones de expresión inmunohistoquímica de las proteínas S-100, HMB-45 y MART-1 para el diagnóstico diferencial de melanoma maligno y nevo melanocítico en biopsias de piel humana. Se utilizaron treinta y nueve biopsias de tejido humano, las que fueron divididas en dos grupos: 19 en melanoma maligno y 20 en nevos melanocíticos. A continuación, las muestras se fijaron con paraformaldehído y se procesaron siguiendo el protocolo convencional para su inclusión. Luego, se realizó la tinción inmunohistoquímica. Finalmente, se realizó el análisis histológico y cualitativo de las muestras. Los marcadores S-100, HMB- 45 y MART-1 mostraron inmunorreacción positiva en biopsias de melanoma. El marcador HMB-45 estuvo generalmente presente con una expresión más débil que S-100 y MART-1 en biopsias de nevo melanocítico. No se observó ningún patrón de expresión que asocie específicamente uno o más marcadores con algunos tipos de diagnóstico histopatológico. La inmunohistoquímica es fundamental en el diagnóstico diferencial de melanomas y nevos melanocíticos. Sin embargo, no existe ningún anticuerpo o panel de anticuerpos que permita un diagnóstico inequívoco entre el melanoma y el nevo. Por tanto, es necesario analizar con cuidado el patrón de expresión y la localización de la lesión utilizando características morfológicas estándar.

Integrated optical density analysis of the immunohistochemical expression of the progesterone receptor in the uterine endometrium of prepubertal araucana sheep / Análisis por densidad óptica integrada de la expresión inmunohistoquímica del receptor de progesterona en el endometrio uterino de ovejas prepúberes de raza araucana

SUMMARY: Progesterone receptors are expressed in the reproductive organs of adult sheep, where they regulate morphofunctional and reproductive development. However, various studies have shown the presence of these receptors in the uterus of prepubertal females. It is not clear what role these receptors have at this level of development in uterine tissue. Therefore, it is relevant as a first step in the investigation, to determine the expression and histological distribution of the progesterone receptor in prepubertal sheep in order to determine possible functions at this level of reproductive development. Immunohistochemical analysis allows visualizing the specific presence of a protein in the cellular and histological context, however, the results displayed through digital images are qualitative data and subject to the observer's criteria. In this work, a quantitative analysis method of immunohistochemical expression of the progesterone receptor in ovine endometrium is presented, using digital analysis of images, by means of integrated optical density of digital photographs of histological sections processed with immunohistochemical methods. The results show the possibility of quantitatively evaluating the expression of progesterone receptors in the endometrial stroma and prepubertal endometrial glands by applying the integrated optical density analysis of digital images.

RESUMEN: Los receptores de progesterona se expresan en los órganos reproductores de ovejas adultas, donde regulan el desarrollo morfofuncional y reproductivo. Sin embargo, diversos estudios han demostrado la presencia de estos receptores en útero de hembras prepúberes. No está claro, el papel que estos receptores tienen en este nivel de desarrollo en tejido uterino. Por lo que, es relevante como primer paso en la investigación, determinar la expresión y distribución histológica del receptor de progesterona en ovejas prepúberes con el fin determinar posibles funciones en este nivel de desarrollo reproductivo. El análisis inmuno- histoquímico permite visualizar la presencia específica de una proteína en el contexto celular e histológico, sin embargo, los resultados visualizados a través de imágenes digitales, son datos cualitativos y sujeto al criterio del observador. En este trabajo se presenta un método de análisis cuantitativo de expresión inmunohistoquímica del receptor de progesterona en endometrio ovino, utilizando análisis digital de imágenes, mediante densidad óptica integrada de fotografías digitales de cortes histológicos procesados con métodos inmunohistoquímicos. Los resultados muestran la posibilidad de evaluar cuantitativamente la expresión de los receptores de progesterona en el estroma endometrial y las glándulas endometriales prepúberes aplicando el análisis de densidad óptica integrado de imágenes digitales.

Resistencia a la meticilina y producción de biopelícula en aislamientos clínicos de Staphylococcus aureus y Staphylococcus coagulasa negativa en México / Methicillin resistance and biofilm production in clinical isolates of Staphylococcus aureus and coagulase-negative Staphylococcus in México

Resumen Introducción. Las infecciones por Staphylococcus aureus y Staphylococcus coagulasa negativa multirresistentes a los antibióticos y asociadas con la atención en salud tienen un gran impacto epidemiológico por su alta morbimortalidad; además, se han relacionado con la formación de biopelículas, lo cual también se asocia con la resistencia a los antimicrobianos. Objetivo. Determinar la resistencia a la meticilina y cuantificar la producción de biopelículas para establecer su posible relación con los aislamientos clínicos de S. aureus y Staphylococcus coagulasa negativa. Materiales y métodos. Se estudiaron 11 cepas de S. aureus y 12 de Staphylococcus coagulasa negativa. La resistencia a la meticilina se determinó con discos de cefoxitina tomando como valores de referencia los estándares del Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI) de 2018. La producción de biopelícula se cuantificó con cristal violeta. Los genes mecA e icaADBC se identificaron mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR), y se hizo un análisis bivariado con la prueba de ji al cuadrado y el coeficiente V de Cramér, utilizando el programa SPSS™, versión 20.0. Resultados. Nueve cepas de S. aureus fueron resistentes a la meticilina (SARM) y dos fueron sensibles. Ocho cepas de Staphylococcus coagulasa negativa fueron resistentes y cuatro fueron sensibles. El genotipo mecA se encontró en ocho de las nueve cepas de S. aureus y en seis de las ocho de Staphylococcus coagulasa negativa resistentes a meticilina. Todas las cepas formaron biopelícula. Diez cepas de S. aureus y 11 de Staphylococcus coagulasa negativa presentaron el genotipo icaADCB. No se encontró asociación entre la resistencia a meticilina y la formación de biopelícula. Conclusiones. La cefoxitina es suficiente para determinar el fenotipo resistente a meticilina y se asoció con el genotipo mecA. Las cepas resistentes a la meticilina y poseedoras del gen mecA pueden presentar un mecanismo de resistencia alterno. Los dos grupos de cepas formadoras de biopelícula se relacionaron con la presencia del operón icaADCB. La formación de biopelícula y la resistencia a la meticilina se expresaron como características independientes en los dos grupos de cepas.

Abstract Introduction: Infections associated with health care caused by S. aureus and coagulase- negative Staphylococci multi-resistant to antibiotics cause a high epidemiological impact due to their high morbidity and mortality. Biofilm formation, which has been associated with antimicrobial resistance, can also occur. Objectives: To determine methicillin resistance and to quantify the biofilm production to establish if there is a relationship in clinical isolates of S. aureus and coagulase-negative Staphylococci. Material and methods: A total of 11 strains of S. aureus and 12 of coagulase-negative Staphylococci were studied. Methicillin resistance was determined with cefoxitin discs and the Clinical Laboratory Standards Institute (CSLI), 2018 reference values. Biofilm production was quantified by the crystal violet method. The mecA and icaADBC genes were identified by PCR. A bivariate analysis was performed with chi-square (c2) and Cramér's V statistical tests, using SPSS™, version 20.0 software. Results: Nine S. aureus strains were methicillin-resistant and two were sensitive. Eight coagulase-negative Staphylococci strains were resistant and four were sensitive. The mecA genotype was found in eight of the nine S. aureus resistant strains and six of eight resistant coagulase-negative Staphylococci. All strains formed biofilms. Ten strains of S. aureus and 11 of coagulase-negative Staphylococci presented the icaADCB genotype. No association was found between methicillin-resistance and biofilm formation. Conclusions: Cefoxitin is enough to define the resistance phenotype and is associated with the mecA genotype. All strains formed biofilms and were related to the presence of the icaADCB operon. Biofilm formation and methicillin resistance were independent features in both groups of strains.

Evaluación in vitro de la actividad antimicrobiana de un propóleo chileno sobre muestras clínicas de exudados bucofaríngeos y cepas ATCC / In vitro evaluation of the antimicrobial activity of a Chilean propolis on clinical samples of oropharyngeal exudates

Propolis is a substance manufactured by Apis mellifera and has been widely used in folk medicine due to its high concentration of bioactive compounds. The purpose of the following study was to characterize and evaluate in vitro the antimicrobial properties of propolis on clinical samples and ATCC strains. The chemical characterization of propolis presents a concentration of total polyphenols of 247 ± 9 mg EAG g-1 MS, flavones and flavonols 75± 4 mg EQ g-1 MS, flavanonones and flavanonols 118 ± 11 EP g-1 MS. HPLC-DAD identified apigenin, galangin, phenethyl ester of caffeic acid and pinocembrin, in addition to 16 compounds by HPLC MS/MS. Chilean propolis is a natural antimicrobial, showing effectiveness in strains ATCC Staphylococcus aureus, Candida albicans, Trichophyton rubrum and clinical samples of Staphylococcus aureus unlike Escherichia coli. These results demonstrate the antimicrobial effectiveness of the synergy of compounds present in propolis against different human pathogens.

El propóleos es una substancia fabricada por Apis mellifera y ha sido utilizado ampliamente en la medicina popular debido a su alta concentración de compuestos bioactivos. El propósito del siguiente estudio fue caracterizar y evaluar in vitro las propiedades antimicrobianas del propóleos sobre muestras clínicas y cepas ATCC. La caracterización química de propóleos presenta una concentración de polifenoles totales de 247 ± 9 mg EAG g-1 de MS, flavonas y flavonoles 75 ± 4 mg EQ g-1 de MS, flavanononas y flavanonoles 118 ± 11 EP g-1 de MS. Mediante HPLC-DAD se identificó apigenina, galangina, fenetil éster del ácido cafeico y pinocembrina, además de 16 compuestos mediante HPLC MS/MS. El propóleos chileno es un antimicrobiano natural, observándose efectividad en cepas ATCC Staphylococcus aureus, Candida albicans, Trichophyton rubrum y muestras clínicas de Staphylococcus aureus a diferencia de Escherichia coli. Estos resultados demuestran la efectividad antimicrobiana de la sinergia de compuestos presentes en el propóleos ante diferentes patógenos humanos.

Efecto del extracto de alcaloides de Berberis darwinii Hook sobre respuestas celulares innatas en fagocitos murinos / Effect of the extract of Berberis darwinii Hook alkaloids on innate cellular responses in murine phagocytes

Berberis darwinii Hook es una especie que habita el sur de Chile y la Patagonia. Siendo utilizada por la etnia mapuche para el tratamiento de procesos inflamatorios, estados febriles, y dolor estomacal. El propósito del siguiente estudio fue evaluar in vitro las propiedades del extracto de alcaloides de raíz de B. darwinii sobre respuestas celulares en monocitos desde sangre periférica de rata. Los resultados de la cuantificación del extracto muestran una concentración de alcaloides totales de 1,67 mg/g y la caracterización por HPLC- MS determinó la presencia de berberina y palmatina. In vitro se observó que los extractos disminuyeron la capacidad de adhesión y la actividad fagocítica de los monocitos e inhibieron la translocación del factor nuclear NF-κB asociado a la modulación de la inflamación, pero no así la producción de anión superóxido. Estos resultados indicarían que los alcaloides totales de B. darwinii inhiben algunos mecanismos específicos de defensa celular.

Berberis darwinii Hook is a species that inhabits southern Chile and Patagonia. This is being used by the Mapuche ethnic group for the treatment of inflammatory processes, febrile states, and stomach pain. The purpose of the following study was to evaluate in vitro the properties of an alkaloid extract of B. darwinii root on cellular responses in monocytes from the rat peripheral blood. The results of the quantification of the extract showed a total alkaloid concentration of 1.67 mg/g and the characterization by HPLC-MS determined the presence of berberine and palmatine. In vitro, it was observed that the extracts decreased the adhesion capacity and phagocytic activity of the monocytes and inhibited the translocation of the nuclear factor NF-κB associated with the modulation of inflammation, but not the production of superoxide anion. These results indicate that the total alkaloids of B. darwinii inhibit some specific mechanisms of cellular defense.

Estudio inmunohistoquímico comparativo del receptor de estrógeno en tejido endometrial de ovejas razas Texel y Araucana / Comparative inmunohistochemical study of estrogen receptor in endometrial tissue from Texel and Araucana sheeps

La asociación de factores genéticos, nutricionales y ambientales afecta directamente la fertilidad de las ovejas sin embargo en condiciones de similitud ambiental, la raza es un factor determinante existiendo razas de alta fertilidad como por ejemplo Texel y Suffolk y otras de fertilidad estándar tales como Romney y Criolla Araucana. La fertilidad es modulada por las hormonas sexuales que actúan mediante la unión a receptores específicos. En ovinos el receptor de estrógeno alfa (ER-a) esta ampliamente distribuido en el sistema reproductivo y es responsable de la modulación de varios mecanismos asociados con la función del sistema reproductivo. Un factor posiblemente relacionado con la diferencia en la fertilidad entre razas de ovinos, es el nivel de expresión diferencial de estos receptores en el sistema reproductivo. En el presente estudio se realizo una comparación cuantitativa de la expresión inmunohistoquímica de ER-a se llevó en el endometrio de ovejas prepúberes de ovejas de alta fertilidad (Texel) y de fertilidad estándar (Araucana), mediante la medición de la densidad óptica integrada de la señal inmunohistoquímica en áreas específicas del endometrio. Los resultados indican una diferencia significativa entre la expresión del ER-a a favor de ovejas de raza Texel en todas las áreas de la raza del endometrio de ovejas prepúberes evaluadas. Esta expresión diferencial sugiere una posible relación entre la intensidad de la expresión de ER-a y la fertilidad en las razas ovinas estudiadas en este trabajo.

In breeding sheep high fertility rate is an important consideration factor. The association of genetic, nutritional and environmental conditions directly affects the fertility of ewes. There are high fertility sheep breeds (Texel, Suffolk) and other standard fertility breeds as (Romney, Criolla Araucana). Animal reproduction is modulated by sex hormones that act by binding to specific receptors. In sheep, alpha (ER-a) estrogen receptor is widely distributed in the reproductive system, modulating several mechanisms associated with reproductive system function. One factor possibly related to the difference in fertility between sheep breeds, is the differential expression level of these receptors in the reproductive system. In the present study a quantitative comparison of the immunohistochemical expression of ER-a was carried out in prepubertal sheep endometrium in high fertility (Texel) breed versus standard fertility (Araucana) breed, by measuring the integrated optical density in specific areas of the endometrium. Results indicate a significant difference between ER-a expression in endometrium off Texel breed ewes and Araucana breed ewes, and registered higher levels in all areas of evaluated Texel breed prepubertal ewes. This differential expression suggests a possible link between ER-a expression intensity and fertility in the breeds studied in this work.

Los extractos acuoso y metanólico de Berberis darwinii H. (Berberidaceae) inhiben respuestas celulares innatas en monocitos humanos tratados in vitro / Aqueous and methanol extracts of Berberis darwinii H. (Berberidaceae) inhibit innate celular responses in human monocytes in vitro treated

Berberis darwinii H is a native plant of South America, popularly referred to Michay. This species has historically been used by indigenous cultures of Chile as medicinal herb. To preliminarily assess their anti-inflammatory effects was investigated the aqueous and methanolic root extract this plant in human monocytes. The results indicated that the extracts inhibit the production of superoxide anion, the expression of tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) and interleukin-1-beta (IL-1beta) in monocytes activated with lipopolysaccharide. This result suggests the existence of compounds with potential anti-inflammatory action in these extracts.

Berberis darwinii H. es una planta nativa de América del Sur, conocida popularmente como Michay. Esta especie ha sido históricamente utilizada por las culturas indígenas de Chile como hierba medicinal. Con el fin de evaluar preliminarmente sus efectos anti-inflamatorios, se investigaron dos tipos de extractos; metanólico y acuoso, preparados a partir de la raíz de esta planta. Los resultados indican que estos extractos inhiben la producción de anión superóxido, la expresión del factor de necrosis tumoral-alfa (TNF-alfa) y de interleucina-1beta, (IL-1beta) en monocitos activados con lipopolisacárido. Estos resultados sugieren la existencia de compuestos con potencial acción antiinflamatoria en esta planta.

Efecto del láser de baja energía sobre la expresión de GAP-43 (growth associated protein 43) en nervio isquiático lesionado de rata / Low-energy laser effect on expression of GAP-43 (growth associated protein 43) in rat isquiatic nerve injury

El láser infrarrojo se ha utilizado con fines terapéuticos en artritis reumatoide, dolor músculo-esquelético, enfermedades dentales y óseas. A nivel de lesiones nerviosas, se ha utilizado como coadyuvante en tratamientos conservadores y quirúrgicos; sin embargo, no está claro aún cual es su participación en los mecanismos moleculares asociados al proceso regenerativo. Varios genes y sus productos de expresión relacionados con regeneración axonal, están siendo investigados, entre éstos, la proteína GAP-43 (growth associated protein 43) ha sido detectada en diferentes tipos de lesiones de nervios periféricos, donde su expresión aumenta notablemente durante el proceso de recuperación. Con el propósito de evaluar la expresión del transcrito de GAP-43 en nervio isquiático de rata lesionado y, posteriormente, irradiados con láser infrarrojo de 2 J/cm2, se evaluó mediante RT- PCR en tiempo real la expresión del transcrito de GAP-43, en nervios lesionados tratados y no tratados. Los resultados indican que el nivel de expresión de GAP-43 en nervio tratado con láser de 2 J/cm2 , es mayor que en el nervio lesionado no tratado. También se observó un aumento de la expresión hasta dos semanas post-tratamiento. Estos resultados sugieren un efecto estimulante del láser infrarrojo de 2 J/cm2 sobre la expresión de GAP-43, en nervio isquiático de rata lesionado por compresión, lo cual podría estar relacionado con un menor tiempo de regeneración del nervio.

The Low-energy laser has been used in therapy for rheumatoid arthritis, musculoskeletal pain, dental disease and bone disease. At the level of nerve injury has been used as an adjunct to conservative and surgical treatments is not clear yet although the molecular mechanisms associated with the regenerative process. Several genes and their expression products associated with axonal regeneration are being investigated between these the protein GAP-43 (Growth associated protein 43) has been detected in different types of peripheral nerve injuries, where its expression increases markedly during the recovery process. In order to evaluate the expression of GAP-43 transcript in rat injured sciatic nerve and then irradiated with infrared laser of 2 J/cm2 was evaluated by RT-PCR in real time transcript expression of GAP-43 in nerve treated and untreated injuries. The results indicate that the expression level of GAP-43 in nerve treated with 2 J/cm2 laser is higher than in untreated injured nerve him. There was also an increased expression up to two weeks post-treatment. These results suggest a stimulatory effect of 2 J/cm2 infrared laser on the expression of GAP-43 in rat injured nerve compression, which could be related to a shorter time of regeneration of injured nerve.

Fracturas del pilon tibial: tecnica de fijacion minimamente invasiva. Resultados a mediano plazo / Tibial pilon fractures: minimally invasive percutaneous osteosynthesis. Mid-term results

Introduccion: Debido a la alta incidencia de malos resultados y complicaciones informados en la bibliografia, existen todavia controversias acerca del tratamiento de las fracturas del pilon tibial. El objetivo de este trabajo es describir los resultados obtenidos con una nueva tecnica de fijacion interna minimamente invasiva. Materiales y metodos: Se analizaron retrospectivamente 9 fracturas de pilon tibial, todas tratadas en forma consecutiva entre octubre de 2000 y marzo de 2002. El tiempo promedio de seguimiento fue de 32 meses (rango: 28-40 meses). Resultados: No se observaron complicaciones posoperatorias severas en ninguno de los pacientes. La reduccion fue anatomica o buena en todos los casos. La artrosis hallada fue: grado O en 4 casos; grado 1 en 3 casos y grado 2 en 2 casos. Los resultados funcionales fueron excelentes en 3 casos, buenos en 5 casos y malos en 1 caso. Conclusiones: Los resultados obtenidos en nuestro trabajo sugieren que esta tecnica representa un metodo eficaz en el tratamiento de las fracturas cerradas del pilon tibial y permite la reduccion adecuada y una fijacion lo suficientemente estable para lograr una rehabilitacion precoz del tobillo, sin aumentar el riesgo de infeccion o de da¤o de las partes blandas

Enfermedades concominantes como factor pronostico de morbimortalidad perioperatoria en el abdomen agudo del paciente adulto mayor y anciano en el Centro Naval período enero 1995 a diciembre de 1997

Se realizó el presente estudio descriptivo retrospectivo con el objetivo de determinar que son las enfermedades médicas concominantes el parámetro más importante para determinar los resultados postquirurgicos en el abdomen agudo del paciente anciano. Se consideraron todos los pacientes de 60 a más años que ingresaron con el diagnóstico de abdomen quirúrgico y que fueron intervenidos en el Servicio de Emergencia del Centro Médico Naval, se presentaron 70 casos de abdomen agudo quirúrgico en ancianos, lo que representó el 2.98 por ciento sobre el total de las intervenciones quirúrgicas de emergencia. Los pacientes que no presentaron enfermedades médicas concominantes tuvieron una morbilidad del 16 por ciento. Los que presentaron una enfermedad su morbilidad fue del 47 por ciento y su mortalidad del 5.8 por ciento y los que presentaron tres omás tuvieron una morbilidad del 81.8 por ciento y una mortalidad del 18.15 por ciento. El síntoma principal fue el dolor abdominal 87.14 por ciento, el tiempo promedio de enfermedad fue de 3 días, el tiempo de permanencia preoperatoria en emergencia fue de 16.5 horas. El promedio de días de hospitalización fue de 14.5 días.

Encefalitis por cisticercosis cerebral / Encefalitis by cerebral sicticercosis

Expone que es una enfermedad secundaria a la invasión cerebral por un agente infeccioso parasitario (larva de la Taenia Solium)que luego de atravezar la pared intestinal por vía hematógena llegan a SNC con ubicación parenquimatosa o extraparenquimatosa, dando como consecuencia una reacción inflamatoria de tipo local en el sitio de la lesión (Neurocisticercosis), este último de diagnóstico meticuloso por la presentación del cuadro clínico como este caso clínico. El cuadro de encefalitis se caracteriza por hipertensión intracraneal, edema cerebral, presencia o no de crisis convulsivas focales o generalizadas y, alteraciones de las funciones mentales superiores...